一、实验目的
血细胞计数板统计细胞数量的主要目的是为了获得定量的细胞数据。
二、实验原理
血细胞计数板统计细胞数量的实验原理基于以下几点:
-
特定体积的计数室: 血细胞计数板是一种特制的载玻片,上面设计有精确容积的计数室(如0.1或0.4mm²)。计数室由一系列带有网格线的方格组成,每个大方格内又细分为多个小方格,通常包括一个中央大方格(计数室) 和周围几个小方格(用于校正)。计数室的容积是已知且恒定的,这样可以通过观察和计数该区域内细胞的数量来推算出单位体积内细胞的总数。
-
直接显微镜计数: 将一定量的待测血液样本(经过适当稀释)加入计数板的计数室内,然后覆盖上盖玻片。在显微镜下,通过低倍物镜观察计数室内的细胞分布。计数人员按照预定规则(如只计数完整细胞,不计破碎细胞;对于边界线上的细胞,遵循“上不计、下计,左不计、右计”的原则)逐个或逐格计数可见的血细胞。
-
校正与计算: 计数时通常选取几个大方格(如四角的大方格)进行计数,并计算平均值,以减小偶然误差。对于某些血细胞计数板,可能还需要乘以特定的校正系数(如每个大方格内包含的更小格子数),以得到最终的细胞密度。根据计数室的已知容积和所计得的细胞数,可以计算出单位体积(如每升或每微升)血液中各类血细胞(红细胞、白细胞、血小板)的数量。
-
染色辅助区分与分类: 在某些情况下,为了区分不同类型的白细胞或者判断细胞活性,会进行染色处理。例如,利用瑞氏染色(Wright stain)或吉姆萨染色(Giemsa stain)使细胞核和胞浆呈现不同的颜色,有助于区分粒细胞、淋巴细胞、单核细胞等白细胞亚型。对于活死细胞的区分,可以采用如台盼蓝染色(Trypan blue exclusion),活细胞因其完整的细胞膜不吸收染料而呈无色,死细胞则被染成蓝色。
三、实验方法及步骤
我的视频笔记




















