以下东西全部储存在2-8℃的地方。
固定液(500ml)
50%的甲醛(也即250ml);
10%的乙酸(也即50ml)
100mM的醋酸铵(可以用5M的醋酸铵母液,加的量就是10ml)
然后最后加水补足到500ml。
敏化液(100X,100ml的量)
0.5% Na2S2O3 ————称取0.78g,然后加水100ml;
显影液(100ml的量)
0.036%甲醛————也就是需要加的量是36ul;
2%的Na2CO3————也就是2g;
然后最后就是加水补充到100ml的量。
银染液(100ml的量)
0.1%AgNO3——也就是需要称量0.1g;
然后加水补充到100ml。
终止液(100ml的量)
C6H8O7.H2O(一水柠檬酸)称取0.25g,然后加水补充到100ml。
银染的具体步骤
①固定:胶剥离,然后用ddH20重新干净,固定液没过胶体,摇床室温摇45分钟;
②漂洗:弃固定液,ddH20室温摇床,5min/2次;
③敏化:弃漂洗液,加入1X的敏化液,室温摇床,45min;
④漂洗:弃敏化液,ddH20室温摇床,5min/2次;
⑤银染:加入0.1%AgNO3,室温摇45min;
⑥漂洗:弃银染液,ddH20室温摇床,5min/2次;
⑦显影:加入显影液,室温摇1-3min,至条带清晰为止;
⑧终止:加入终止液,室温摇10min,然后换成ddH20。