机器开机
- 首先我们先将荧光光源的那个开关开上，这个理论是开了半个小时才能使用的；
- 然后顺序的话，其实是没啥要求的，然后就开电脑的电源还有就是显微镜的电源。
放置样品
1.机械臂推到后面，然后将样品放在我们的载物台上；
2.载物台的放置是有讲究的，需要从后往前放，利用弹簧将这个卡住；
3.像开车一样的加速杆的手柄是调节载物台方向的；
4.上面那个是粗准焦螺旋和细准焦螺算；
5.下面那个是调整明场的亮度的。
普通观察
1.首先就是要打下来这个明场的光，机械上这个挡板是调节光的有无的，必须打下来才是有光的。
2.就是调整明场所需要的模式，一般就是BF模式。这个有几个模式，BF是明场的情况下的，这个往左拨动可以调节其他的模式。BF这个就是白光下的相差模式，因为就是细胞是透明的，观察起来非常不清楚，所以需要有一个相差模式。然后就是我们发现就还有PH0 、PH1 、还有PH2，这个主要是取决于物镜，就是不同的物镜是对应着不同的这个模式的，这个可以通过物镜上面的标识看出来。
3.然后就是检查一下镜深：上面还有一个镜深的，就是这个数值越小，看这些厚的东西就是越清晰，但是牺牲了一定的分辨率。然后我们一般就是调整到最大的，这样的话看的比较清晰，但是对应的就是我们更容易看清薄的地方。正常一般就是最大，因为我们不会切得太厚。
荧光观察
1.首先就是荧光的光源需要打开，注意看一下这个荧光的系统这个会不会亮，然后旁边还有一个可以调节荧光的亮度的；
2.然后就是那个明场的光源我们需要关闭一下，不然就会有光源的干扰，就是需要将那个挡板打上去；
3.然后就是切换光源，转换到荧光的光源：转动这个转盘，然后就能切换荧光块；
4.对于荧光的选择问题：
①DAPI
激发光：325——375，然后发射光435——485，DPAI是紫外光激发，其实发出来的光是蓝色的
②FITC
激发光是460——500，然后发射光是512——542，这个是蓝光激发，然后样本发出的是绿色
③CY5
然后就是CY5,它是红光激发，然后激发出来的就是一个更深的红色了。
然后一般就是绿光去激发，一般就是发出来的是红光
激发光的波长会比发生光的波长要短，所以才会出现什么用蓝光激发的时候发出来光是绿色的。
荧光的选择的话，主要是看发射光，就是看你的那个荧光的发射光是啥，然后你就选择靠近的发射光的荧光通道就行。
5.荧光背景的调整：
这里需要改颜色，一般就是你看下面的圈这个是啥颜色就是啥颜色，一般超过600就是红色了，然后这个Y5因为很红所以可以用紫色代替一下。这个改颜色需要在非预览的情况下才能进行，就是那个live stop的情况下才能进行。
6.是否用电脑看：机身这里这个拉杆，就是调节是用眼睛看，还是用电脑看的，这个拉杆在最里面的时候就是用眼睛看，然后如果是拉出来就是用电脑看的。
7.然后荧光的曝光时间一般弄的是100，然后大家可以点击后面这个A，就是自动曝光。
荧光光源强度调节的几个地方
1.荧光的遮光圈：这个是一个荧光的遮挡圈，把它往最里面推事最亮的，越往外面拉越不亮。
2.荧光光圈大小调节：
3.荧光有无拉杆：这个东西是直接开光这个荧光的。正常的就是推到最里面就是有荧光，然后拉出来就是没有荧光。
4.可以通过软件的image format进行调整：如果实在不行，我们可以调节这个image Format，如果是2x2这个亮度就会非常亮
软件的操作
1.软件三个主要分区的介绍：
2.曝光时间的调整：曝光时间的调整，就是正常情况下，你用眼睛看到的时候这个曝光的时间就是10——20s左右，如果这个曝光的时间太长就会导致啥都看不清楚。这个曝光时间就是取决于光的亮度，如果说这个光的亮度很亮的时候，曝光的时间就需要更短一些。
3.然后选择标尺：这个选择倍镜的时候，就是为了到时候添加标尺用的。（这个应该是选择拍照的时候才会弹出来）
4.检测是否过曝：检测一下是否过曝。这个时候然后你去调节一下曝光的时间的，然后就不太会过曝，这个东西你可以点击三次，一次就是普通的，然后一次就是过曝，还有一次就是维彩。
5.拍照的话，下面三个随便选择哪个都行
6.荧光图片重叠问题：通道叠加，就是先选择你需要叠加的图片，然后就是选择overlay，然后就可以叠加了。
然后你点击这三个这个，就会出现一个叠加的效果
这里就是三张图片，然后你可以选择你想去掉哪一张
文件储存以及导出问题
0.文件导出最推崇的：我们可以直接导出所有的文件，就是选择这个project，然后右键，然后save as，然后选择的就是这个lif格式，这个就是laica的专用格式，这个就是可以本地自己下载软件也可以用。
1.文件储存地方：我们的文件储存在这里，就是Open project，然后双击可以重新命名一下。
2.单张图片导出的一些设置
3.一些关于标尺参数的调整：点击这个标尺后面这个省略号就是为了去调节标尺的一些参数
